药学专业研究生毕业论文节选(共9933字)

所属栏目:医药学论文 发布日期:2021-03-04 16:24:50 论文作者:佚名
药学专业研究生毕业论文节选第一篇论文题目:不同产地的杜仲遗传多态性及杜仲叶活性成分含量研究本论文是药学论文,笔者拟利用微卫星标记技术对不同地域来源的杜仲进行遗传多态

药学专业研究生毕业论文节选第一篇

论文题目:不同产地的杜仲遗传多态性及杜仲叶活性成分含量研究


本论文是药学论文,笔者拟利用微卫星标记技术对不同地域来源的杜仲进行遗传多态性研究,探讨杜仲主要产地的遗传结构及亲缘关系。

引言

杜仲CEwcomm/fl ulmoides OHv.)为杜仲科杜仲属落叶乔木,在我国主要分布在秦岭以南华中地区的四川、贵州、湖南、湖北、陕西等省[1]。其皮、叶作为中药材,均有补肝肾,强筋骨之功效⑴。研究表明杜仲中含有的环烯醚萜类、木脂素类、苯丙素类、黄酮类化学成分具有调节血压作用,其中桃叶珊瑚苷有较强的护肝作用,绿原酸具有明显的抗菌活性[3]除较高的药用价值外,杜仲在经济上的开发前景极大,在食品、保健品、医疗、通讯设备等行业运用广泛。此外,作为目前杜仲科杜仲属仅存的孑遗植物,杜仲对于研究我国植物起源和被子植物演变等方面都具有非常重要的参考价值。尽管近年来我国杜仲引种栽培,资源不断扩大,野生资源仍在不断减少,这就意味着孑遗树种杜仲在栽培过程中会出现种源变异和质量退化等现象。另外,由于杜仲植物地理分布广,形体变异大,药材品质差异也大。因此对杜仲种质资源的遗传多态性进行评估及保护工作,推广杜仲遗传优良品种的引种培育,对避免盲目的引种以及杜仲物种的演化发展具有极其重要的意义。

一个物种对环境适应能力的强弱取决于该物种种内的遗传多态性或遗传变异[31],因此对生物遗传多态性及其亲缘关系的分析是保护生物多态性、探讨物种进化机制以及遗传资源利用的前提。运用快速可靠的手段对种质资源进行遗传多态性分析,明确其遗传距离,获得亲缘关系对于物种的遗传学研究、种质资源的幵发利用及改良均有重要意义。微卫星DNA (SSR)因其所具有的多态性高、共显性、易检测、重复性好等优点,己成为居群遗传多态性研究中有效的分子标记之一。与传统基因组SSR相比,表达序列标签-简单重复序列(EST-SSR)具有基因组SSR优点的同时标记又与功能基因相关联,开发意义更大,在中药种质资源评估及分子辅助育种等方面更具优势。但目前关于杜仲种质资源的遗传基础研究相对薄弱,缺乏遗传领域的知识积累,因此有必要开展杜仲微卫星标记的遗传多态性研究,为构建我国杜仲种质资源的SSR基因型数据库奠定方法学基础。

本研究拟利用微卫星标记技术对不同地域来源的杜仲进行遗传多态性研究,探讨杜仲主要产地的遗传结构及亲缘关系。同时对不同产地杜仲叶的活性成分含量进行测定,从遗传差异和药材品质上对不同产地杜仲共同进行评估。研究结果可为杜仲的种质资源的分类和利用提供遗传水平的依据,为其分子辅助育种奠定基础,对保护药用植物生物多样性,推动中药资源可持续发展以及大宗中药材的综合开发利用有着重要作用。

第一章杜仲试验样品采集及SSR-PCR反应体系的建立

1材料

1.1不同产地样品采集

查阅相关文献资料收集杜仲资源分布、生态环境、采收等信息,以此拟定了湖南、贵州、陕西、重庆四个省市的杜仲生长地作为样品采集地区,其中以湖南省作为重点。采集10年左右树龄的杜仲叶片为材料,作为当地种源的代表,每株采集高度保证生态位基本一致,记录采集地经炜度、海拔高度、主要形态等信息。样品取无病虫害、健壮的杜仲嫩叶,桂胶快速干燥保存,移至实验室保存于-80℃冰箱中备用。样品信息见表1.1。

1.2仪器

BioPhotometer plus型核酸蛋白仪(Eppendorf公司),MyGene L96型PCR扩增仪(杭州朗基科学仪器有限公司),EPS-300型电泳仪(上海天能科技有限公司),VE-180型垂直电泳槽(上海天能科技有限公司),GIS-1000B型凝胶成像系统(上海天能科技有限公司)。

1.3试药

TaqrDNA聚合酶、dNTP Mixture、MgCh试剂、10X PCR Buffer购自TaKaRa公司;XDNA/Hind ffi购自北京天根生物科技有限公司;100 bpphis DNA Ladder、30% Acrylamide-Bis购自北京索莱宝科技有限公司;Gelred突光染料(美国Biotium公司)购自上海开放生物技术有限公司。引物是从NCBI(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)网站下载的EST (表达序列标签)序列经Primer 3等生物信息学软件设计而来,再经上海生工生物技术有限公司合成,编号为C93、C115,引物序列见表1.2。

2方法与结果

2.1杜仲叶基因组DNA的提取

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